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产品解析 | 第19期：QIAcuity数字 PCR 系统Issuing time:2024-09-26 16:55  继第一代PCR+电泳分析、第二代荧光定量PCR后，2006年市面上推出了第一款商业化数字PCR（Digital PCR，dPCR）系统。小编认为dPCR是微流控和荧光定量PCR在时光发展隧道上的强强结合，即采用微流控技术将荧光定量PCR试剂体系分散成包含一个或不包含目标分子的微反应单元，通过扩增后终点信号“有或无”来实现不依赖于标准品和标准曲线的单分子绝对定量，对抑制物的耐受度也相对较高。 与常规PCR相比，dPCR需要在体系配制后继续完成微反应单元的液体分散与封闭，早期依据流程的分体式仪器，目前已逐渐发展至全集成一体化仪器。QIAGEN公司QIAcuity纳米微孔板式数字PCR系统就是这样一款代表性产品，也是今天小编介绍的主角，其独特的创新点在于微孔的分液及密封完全由仪器内部自动化完成，且每个小孔独立密封，无需使用油相避免交叉污染。 01 【产品简介】 QIAcuity数字 PCR 系统的主要特点：  02 【芯片解析】 QIAcuity数字 PCR 系统操作及检测步骤示意图：  操作者配制好反应体系后，通过移液器转移到芯片上的加样口，贴上配套的弹性封板膜后，用滚轮滚压使膜紧贴，纳米微孔板上机后，体系分配、微孔密封、扩增、成像检测及结果分析，均在一台仪器内全自动完成。 一、芯片结构  二、流体解析   "QIAcuity数字 PCR 系统运行视频" 03 【小编点评】 一、产品优势 1、集成度高：反应体系分配、微孔密封、扩增与成像检测模块均集成到一台仪器中，操作者只需要完成反应体系上样与微孔板密封，检测分析流程全自动完成。 2、仪器通量高：微孔板样本通量、仪器微孔板上机数量、及检测荧光通道，均有多种选择可灵活搭配，以适配不同需求的应用场景。 3、微孔独立密封：常规微孔形式的数字PCR反应体系采用油封的方式不同，QIAcuity采用单面胶滚压变形的方式，堵塞不同微孔之间的流道，将每个反应微孔实现了独立密封，避免交叉污染。 二、技术难度或门槛 微孔板芯片加工与封装工艺。微孔板上单个样本通道微反应池数量最多达26000个，流道和反应池深度分布在20-150 μm，对精密注塑要求非常高。除此，微孔板底面的单面胶及上端加样口的橡胶密封膜工艺特殊，单面胶在产品制造时需要将贴合力度精准控制，以防止过度按压提前堵塞流道，但又需要实现每排串联微孔的密封；橡胶密封膜密封性好，且弹性极好，需要在高度变形条件下还能与微孔板紧贴。 三、技术平台的应用展望 数字PCR发展近二十年，随着技术的不断发展和市场的不断拓展，分体式、单通道设计已经难以满足应用需求，QIAcuity集成化、独立微孔密封的优势，相信在不久的将来，定会突破医药、实验室的使用，推向体外诊断领域，当然，这也将面临简化操作包括界面，相关配套试剂的批准挑战等。 注： 1. 参考文献： ▶ 专利EP3740314B1，CN111601661； 2. 图片和视频来源：QIAGEN中国官网、公众号和其他互联网公开信息； 3. 转载请获本司授权，并在文首注明出自：霆科生物（微信号HZTKSW），并注明作者“霆科生物Peng”。 推荐阅读   |
